Het verhaal van Dag & Nacht wordt twee jaar na seizoen 1 weer opgepakt. In hetzelfde ziekenhuis, maar dan op een andere afdeling. Linda is hoofd van de afdeling Kindergeneeskunde en ziet werk en privé graag gescheiden bij de artsen en verpleegkundigen van haar afdeling. De net aangestelde kinderarts Naima zoekt haar weg in het ziekenhuis waar ze eerst patiënt was. Ze hoopt een nare periode te kunnen afsluiten maar dat wordt lastig als ze haar ex tegenkomt; hij is inmiddels vader van een zoontje. Kinderarts Jerry worstelt met het kersverse ouderschap en zijn samengestelde gezin met verloskundige Ella. Ze merken dat de zorg voor Vivi niet makkelijk te combineren is met hun werk. Dat Vivi niet goed slaapt brengt extra stress met zich mee. De ervaren verpleegkundige Trui heeft zich ondertussen van de afdeling Verloskunde over laten plaatsen naar Kindergeneeskunde. Wanneer daar een vondeling wordt binnengebracht, weet ze haar moederlijke gevoelens maar moeilijk te onderdrukken.